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2020年銀水灣論壇—非洲豬瘟系列檢測技術(shù)與疫苗研發(fā)的進(jìn)展及 實驗室檢測在非洲豬瘟防控中的作用


5月15日,由哈爾濱國生生物科技股份有限公司主辦的銀水灣論壇網(wǎng)上課堂開講啦。第一節(jié)課由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所豬傳染病研究室主任、豬烈性傳染病創(chuàng)新團(tuán)隊首席科學(xué)家仇華吉研究員給大家?guī)怼蹲咴诓《厩懊?---實驗室檢測在非洲豬瘟檢測中的作用》。

仇老師主要從事豬瘟、非洲豬瘟和偽狂犬病等烈性傳染病的基礎(chǔ)和應(yīng)用研究。先后主持國家863項目、國家十三五重點研發(fā)項目、國家自然科學(xué)基金重點項目等20余項,以通訊作者發(fā)表SCI收錄論文70余篇,獲國家科技進(jìn)步二等獎2項、黑龍江省科技進(jìn)步一等獎3項、國家發(fā)明專利9項、農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品安全證書2個,主編或參編學(xué)術(shù)專著8部。

非洲豬瘟自2018年進(jìn)入中國,已經(jīng)在我國擴(kuò)散和流行近兩年時間。現(xiàn)在這個病大面積已經(jīng)被控制住了,但是在局部地區(qū)還呈現(xiàn)區(qū)域性的散發(fā)或者地方性的流行。本次網(wǎng)上講堂特邀仇華吉研究員給我們講述非洲豬瘟系列檢測技術(shù)與疫苗研發(fā)的進(jìn)展及實驗室檢測在非洲豬瘟防控中的作用等一系列問題。下面讓我們走進(jìn)仇老師的課堂。

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仇老師給大家細(xì)致的分析了當(dāng)前養(yǎng)豬業(yè)的形勢:目前我國種豬缺口比較大,產(chǎn)能有限,恢復(fù)正常生產(chǎn)性能仍要一段時間;生豬的存欄量處于一個較低水平,總體市場供應(yīng)呈現(xiàn)出一種供不應(yīng)求的情形,因此豬肉價格整體來說還是會緩慢的上漲。

仇老師指出目前國家對于養(yǎng)豬業(yè)的任務(wù)要求:到2020年底,我國農(nóng)業(yè)部要求我國的生豬存欄量恢復(fù)到疫情前的80%,選取一部分肉豬(三元母豬)進(jìn)入種豬行列,盡快恢復(fù)產(chǎn)能,養(yǎng)豬業(yè)是我們國家“穩(wěn)產(chǎn)保供”的一個政治任務(wù),這是一個民生課題,是關(guān)系國家國計民生的大事。


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那么,對于非洲豬瘟大家是如何看待的呢?仇老師表示,科學(xué)家以及養(yǎng)殖戶經(jīng)過一年多與非洲豬瘟的較量,已經(jīng)對它有了科學(xué)的認(rèn)識,少了最初爆發(fā)時的恐懼,只要依靠生物安全技術(shù)以及科學(xué)的精細(xì)化管理,另外在資金、技術(shù)、人才方面有一定的保障,非洲豬瘟是可防可控的。


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我們國家養(yǎng)豬業(yè)是一個系統(tǒng)工程,所以防控非洲豬瘟更應(yīng)該注重的是在品種、營養(yǎng)、環(huán)境、管理、防疫等方面的綜合實力。仇老師向大家分享了科學(xué)的“防非戰(zhàn)略”:篤定決心、堅定信心,系統(tǒng)思維、綜合防控,科學(xué)決策、精準(zhǔn)施策,實事求是,與時俱進(jìn);以及“防非策略”:控制傳染源頭,降低病毒載量,提升感染閾值,維持陰性群體。防非的重點主要在于防控,仇老師告誡我們應(yīng)當(dāng)重點關(guān)注防控非洲豬瘟的三個重要環(huán)節(jié):阻斷病毒源頭,降低病毒載量,提高豬只耐受性。

現(xiàn)在新冠肺炎疫情后的復(fù)工復(fù)產(chǎn)已基本開始了,一些豬場陸續(xù)開始復(fù)養(yǎng)。為了使大家復(fù)養(yǎng)成功,仇老師講解了復(fù)養(yǎng)的程序主要有以下幾個方面:①復(fù)養(yǎng)前,進(jìn)行風(fēng)險評估,評估豬場所在位置的大環(huán)境。②豬場硬件設(shè)備升級改造,對豬場制度流程的完善。③定期全面洗消(消毒-清洗-消毒-干燥-熏蒸)。④科學(xué)、全面的取樣、采樣。⑤哨兵豬的選取。⑥技術(shù)人員持證上崗,系統(tǒng)培訓(xùn),定期考核。⑦全面復(fù)養(yǎng),持續(xù)檢測。⑧制定應(yīng)急預(yù)案,并反復(fù)演練。

仇老師強(qiáng)調(diào),科學(xué)復(fù)養(yǎng)的過程其實并不難,但是復(fù)養(yǎng)完成后,更應(yīng)該引起我們重視的是如何避免病毒再次光臨豬場呢?仇老師表示,要通過實驗室檢測,實驗室檢測就像國防雷達(dá)系統(tǒng)一樣,是養(yǎng)豬人的眼睛,大家肉眼是看不到病毒的活動跡象的,但是可以借助科學(xué)的生物安全監(jiān)測,包括風(fēng)險預(yù)警、洗消效果評價、生物安全流程優(yōu)化、精準(zhǔn)清除復(fù)養(yǎng)前評估等。

仇老師向我們介紹了實驗室常用的非洲豬瘟檢測方法,分為核酸檢測、抗原檢測和抗體檢測。仇老師有細(xì)致的分析了不同的檢測方法的各優(yōu)缺點。如下表所示。


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實驗室檢測非洲豬瘟的試劑盒,仇老師具體介紹了兩種熒光PCR試劑盒:普通型和免提取型。同時與其他試劑盒的各個參數(shù)進(jìn)行了比較,為大家選取適合自己豬場的試劑盒提供參考。另外還有敏感性比較好的抗原抗體檢測方法可供大家選取。


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如果大家擔(dān)心遇到非洲豬瘟和豬瘟兩種不同傳染病交叉感染的情況時,不要慌!仇老師向我們系統(tǒng)的講解了非洲豬瘟和豬瘟雙重?zé)晒舛縋CR的方法,非洲豬瘟敏感性為每微升10拷貝,而豬瘟的檢測限可達(dá)每毫升10 TCID50。


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各種實驗室檢測的原理、方法,仇老師已經(jīng)全面的向大家展示了,但是為了在檢測時不出現(xiàn)污染的情況,仇老師告誡我們,實驗室檢測布局也是獲取正確的實驗結(jié)果所必須的,實驗室檢測布局要做到實驗功能分區(qū),樣品處理、核酸提取、加樣、PCR擴(kuò)增等不同區(qū)域單向流動,互不交叉;在做完實驗后要對實驗區(qū)域進(jìn)行消毒,保證后續(xù)實驗順利進(jìn)行;實驗過程要進(jìn)行生物安全措施,對樣品進(jìn)行無害化處理;定期對實驗室環(huán)境進(jìn)行評估,以及各種污染治理。


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檢測前,科學(xué)合理的采集樣品也是保障實驗室檢測順利進(jìn)行的一個重要環(huán)節(jié),而且仇老師也著重強(qiáng)調(diào)了,采樣不僅僅只是在豬場內(nèi)外環(huán)境,還要對人員及運輸車輛入場前、洗消烘前后進(jìn)行采樣,對于高風(fēng)險豬可以采樣后再進(jìn)行無害化處理,為后續(xù)防控提供依據(jù)。

檢測后,對實驗結(jié)果出現(xiàn)假陽性和假陰性怎么辦?別急,仇老師分析原因可供大家參考:①檢測方法/試劑盒的特異性和敏感性差;②環(huán)境污染(氣溶膠污染、人員流動造成交叉污染、儀器消毒不徹底等);③采樣不規(guī)范,樣品處理或保存不當(dāng),樣品中含有其它雜質(zhì)等;④核酸提取/PCR擴(kuò)增失?。虎莶《净蚪M發(fā)生變異。

仇老師表示,避免出現(xiàn)這些假陽性和假陰性的實驗結(jié)果,就要提高實驗室檢測的準(zhǔn)確性,可以從以下幾個方面注意:①技術(shù)人員定期培訓(xùn);②優(yōu)化實驗流程方案;③設(shè)立對照組;④選擇特異性好,靈敏度高的檢測試劑盒;⑤選擇實驗最適合的檢測方法;⑥PCR實驗室環(huán)境污染監(jiān)控,監(jiān)控頻率要每周1至2次。

隨后,仇老師給大家介紹了實驗室常見的檢測誤區(qū),包括:檢測與臨床的脫節(jié)、實驗室設(shè)計不合理、采樣設(shè)計不科學(xué)、檢測滯后、混淆診斷性樣本和篩查性樣本、分不清診斷性檢測和風(fēng)險評估、對檢測方法的優(yōu)缺點認(rèn)知不清等一系列實驗室常見問題;并著重對并聯(lián)檢測和串聯(lián)檢測進(jìn)行講解。


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最后仇老師在直播間進(jìn)行了答疑,解決了大家的問題,非常感謝仇老師為大家解答疑惑。這一次課堂仇老師系統(tǒng)全面的從當(dāng)前養(yǎng)豬業(yè)的形勢和任務(wù)、對非洲豬瘟的科學(xué)認(rèn)知、防非的系統(tǒng)思維、非洲豬瘟防控關(guān)鍵點、非洲豬瘟疫情后的復(fù)養(yǎng)程序和實驗室檢測各個方面進(jìn)行系統(tǒng)的闡述,為非洲豬瘟疫情后我國養(yǎng)殖戶恢復(fù)豬只飼養(yǎng)提供了全方位的指導(dǎo),希望能給大家?guī)韼椭?。最后,再次感謝仇華吉研究員的精彩分享!

 

銀水灣論壇:             

自2016年以來,《銀水灣論壇》已成功舉辦四屆。論壇由哈爾濱國生生物科技股份有限公司(動物用生物制品國家工程研究中心)與股東單位哈爾濱維科生物技術(shù)開發(fā)公司、哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司共同主辦,中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所、中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所、北京中海生物科技有限公司協(xié)辦。

四年來,本著“引領(lǐng)中國獸用生物制品產(chǎn)業(yè)技術(shù)創(chuàng)新與融合發(fā)展,構(gòu)建公益性平臺的辦會宗旨”,匯聚行業(yè)精英各抒己見,聚焦行業(yè)健康發(fā)展共商良策,力求從不同視角、更高角度為行業(yè)同仁們提供一個展示與交流的平臺,促進(jìn)行業(yè)技術(shù)進(jìn)步,《銀水灣論壇》已成為在業(yè)內(nèi)享有較高盛譽和影響力的行業(yè)盛會。

《銀水灣論壇》網(wǎng)上課堂會繼續(xù)秉持“創(chuàng)新、融合、發(fā)展”的精神,邀請業(yè)內(nèi)大咖做客直播間,為大家構(gòu)建便捷、有效、公益性的前沿知識學(xué)習(xí)平臺。

企業(yè)介紹:

哈爾濱國生生物科技股份有限公司(動物用生物制品國家工程研究中心,以下簡稱國生生物)是經(jīng)國家發(fā)改委批準(zhǔn),由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所牽頭,聯(lián)合中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所等企事業(yè)單位共同組建、具有獨立法人資格的科技型高新技術(shù)企業(yè),是動物生物制品行業(yè)內(nèi)唯一的國家級工程研究中心。形成了從動物生物制品的研發(fā)、孵化、轉(zhuǎn)化到生產(chǎn)和銷售的全產(chǎn)業(yè)鏈,建立了多個開放性技術(shù)平臺,成為國內(nèi)領(lǐng)先的動物生物制品新產(chǎn)品的創(chuàng)新基地、孵化基地和示范性生產(chǎn)驗證基地。

牧科傳媒 陳靜整理